愛華網(wǎng)人類的健康發(fā)展和微生物的感染息息相關(guān)，抗生素的發(fā)明阻止了細(xì)菌的肆虐，對病毒感染人類目前還沒有徹底的解決之道，經(jīng)血傳播的病毒更是威脅著人類的健康，乙肝、甲肝、HIV和丙肝，一個(gè)接一個(gè)。不幸的是人類對災(zāi)害的認(rèn)識往往遲于它的發(fā)生，法國和日本的八因子HIV污染事件導(dǎo)致社會的政治危機(jī)，但不知還有多少類似事故被無情的掩埋。但人類的恐懼不會被掩埋，作為血友病患者的您整天膽顫心驚，不知那天災(zāi)難降臨。您也許會仰天長嘆：同樣是上帝的子民，為何我的災(zāi)難一重又一重。
二、禍之厲
目前經(jīng)過多年的科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)血傳播的病毒如下：
1．HIV 破壞人體的免疫系統(tǒng)，全球1000余萬人死亡。----致命性，屬于脂包膜病毒。
2．HBV 急慢性肝炎，有相當(dāng)一部分人最終會轉(zhuǎn)變?yōu)楦斡不伟?直至死亡。----致命性，屬于脂包膜病毒。
3．HCV 和HBV類似。----致命性，屬于脂包膜病毒。
4．HAV 急性肝炎，一過性，一次感染，終身免疫。----非致命性，屬于非脂包膜病毒。
5．Parvo B19是微小病毒中危害較大的一種，可能會導(dǎo)致孕婦流產(chǎn)，出血性紫癲，關(guān)節(jié)酸痛等。----非致命性，屬于非脂包膜病毒。
當(dāng)然我們發(fā)現(xiàn)還有很多經(jīng)血傳播的病毒對人類有潛在威脅，主要是一些微小病毒，但對
人類的危害很小。相關(guān)科技人員時(shí)刻在做這方面的研究，以前很少有廠家對Parvo B19進(jìn)
行檢測，1998年開始國外有部分公司將此作為一項(xiàng)常規(guī)檢驗(yàn)，國內(nèi)目前還沒有開展。
三、禍起何因
1．八因子是血漿中最不穩(wěn)定的，在制造工藝中提取它所需的低溫不是最低且所
需的酒精濃度不是最高，較其它血制品它在分離過程中所受到的病毒滅活作用不夠
充分。
2．八因子是最不耐熱的，傳統(tǒng)的用于白蛋白的加熱滅活方法不能用于八因子，除非使用特殊的穩(wěn)定劑。在SD技術(shù)發(fā)明以前，該類產(chǎn)品絕大部分沒有經(jīng)過特殊的病毒滅活處理。
3．血友病患者是長期使用血制品，"中彈"機(jī)會較高。
4．技術(shù)和法律制定的延遲性，病毒的發(fā)現(xiàn)至檢測的商用化有一過程，技術(shù)的使用從摸索到成熟有一過程，法律上不要求到強(qiáng)制性要求又有一過程。
以上幾點(diǎn)足可以解釋為何將八因子列入"高危血液制品"。
四、補(bǔ)天之道
我們真的是手足無措了嗎？不是的。我們已經(jīng)有了解決之道。
1．檢測技術(shù)的進(jìn)步
國際上較大廠商，在血漿篩選中均開始使用高靈敏度的試劑（如：PCR技術(shù)）檢測經(jīng)血傳播的病毒，包括乙肝（HBV）、甲肝（HAV）、愛滋?。℉IV）、丙肝（HCV）和ParvoB19病毒。PCR技術(shù)優(yōu)點(diǎn)是假陰性率低，大大縮短病毒檢測的窗口期，但缺點(diǎn)也是很明顯，主要是它的假陽性率較高，費(fèi)用昂貴，在醫(yī)院臨床上的使用頗多爭議。但在血漿工業(yè)中的優(yōu)勢是不用懷疑的，血漿工業(yè)在篩選試劑方面更看重它的低假陰性率和低窗口期，也就是較小的漏檢率。鑒于普通酶標(biāo)法檢測HCV有較大的漏檢率（比較理想的試劑為2.5%-5%），歐盟已制定相應(yīng)的法規(guī)，對HCV強(qiáng)制性使用PCR檢測。國內(nèi)目前沒有一家廠家將PCR檢測作為血漿篩選的標(biāo)準(zhǔn)，包括HCV。
2．血漿管理的進(jìn)步
①國際上各大公司對獻(xiàn)學(xué)血員有嚴(yán)格的篩查制度，不光檢測，還包括詢問獻(xiàn)血員的一些隱私，避免一些同性戀、吸毒者、性生活混亂者、接受器官移植者等的加入。一次拒絕，終身拒絕，全國范圍內(nèi)拒絕。有些國家也開始鴉片類物質(zhì)的檢測，避免吸毒者加入獻(xiàn)血大軍。
?、趪H上各大公司對采集的初次檢驗(yàn)合格的血漿需存放一定時(shí)期，必需超過以上五種病毒的最長"窗口期"，根據(jù)使用試劑的不同一般定為60天~90天，待獻(xiàn)血員的第二次檢測合格后，第一次采的血漿才可以投入使用，此方法稱"緩役"或"LookbackSystem "或"FeedbackSystem"。鼓勵獻(xiàn)血員重復(fù)多次定期采血，確保血漿最大限度的避免"窗口期"病毒的污染。
?、凵矸葑R別系統(tǒng)采用，全國獻(xiàn)血點(diǎn)的計(jì)算機(jī)聯(lián)網(wǎng)，確保獻(xiàn)血員身份的真實(shí)有效。實(shí)現(xiàn)獻(xiàn)血員數(shù)據(jù)共享。
我們國家在血漿管理方面方面有了長足進(jìn)步，國內(nèi)的廠家也實(shí)施以上的管理措施。1996年開始全國強(qiáng)制使用機(jī)器采血，避免了交叉污染的發(fā)生，該措施的意義在于直接保護(hù)了獻(xiàn)血員，間接保護(hù)了血源，使我國的血漿管理從硬件上上了一個(gè)檔次。目前國家正通過發(fā)行國債募集資金，改善基層血站的硬件設(shè)施，提升我們的檢測和管理水平，最終提高我國血源安全性?，F(xiàn)在舉國上下對血源安全性的認(rèn)識已經(jīng)上升到一個(gè)戰(zhàn)略高度。血源的安全不光和來源地有關(guān)，更重要是和總體管理有關(guān)。
3．病毒滅活的廣泛使用
根據(jù)病毒的不同特性，如是否有脂包膜、是否耐熱、是否耐酸、對輻射的敏感性和直徑的大小等，開發(fā)了多種解決方法。根據(jù)統(tǒng)計(jì)，現(xiàn)在發(fā)達(dá)國家的任何血液制品必須至少使用以下①和②兩種病毒滅活方法中的一種才有可能通過所在國衛(wèi)生部門的批準(zhǔn)上市?，F(xiàn)在逐一介紹：
?、偌訜岱?br /> A.巴氏法 60℃10小時(shí)的水浴加熱,對脂包膜病毒有效，如HIV、HBV和HCV,對部分非脂包膜病毒有效，如HAV,對一部分非脂包膜病毒無效，如ParvoB19。巴氏法是一種比較全面廣譜的病毒滅活方法，幾乎所有廠家用此作為比較耐熱的白蛋白的病毒滅活，但由于技術(shù)掌握的關(guān)系，例如穩(wěn)定劑的使用等，該方法較少用于不耐熱的免疫球蛋白和凝血因子，包括八因子，掌握不好會影響蛋白分子結(jié)構(gòu)。本人記憶中，用該方法處理八因子的國外廠家不超過2家，主要是幾家老牌大公司。
B.干熱法 主要為80℃72小時(shí)干熱，也有100℃1小時(shí)快速干熱法。
C.蒸汽加壓加熱法，10小時(shí)60°壓力190mbar +1小時(shí)80°壓力370mbar。
?、赟D法
全稱為溶劑和去污劑法。首先我們要談以下一個(gè)奇怪的現(xiàn)象，甲肝病毒一般通過消化道傳播，乙肝病毒一般不通過消化道傳遍，但膽汁分泌障礙的人通過消化道感染乙肝的概率較高，有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)這和膽汁溶解乙肝病毒的脂包膜有關(guān)。通過以上原理，科學(xué)界用磷酸丁三脂（TNBT）和聚山梨脂（Tween80）來溶解脂包膜破壞病毒結(jié)構(gòu)起到病毒殺滅作用，實(shí)驗(yàn)和臨床觀察，對脂包膜病毒有非常高的滅活作用，對蛋白分子結(jié)構(gòu)的影響也很低，但美中不足，對非脂包膜病毒無任何效果。一般用于免疫球蛋白和凝血因子，也有用于血漿的滅活。
自從八十年代HBV和HIV的發(fā)現(xiàn)，1985年開始各國法律規(guī)定血制品必須經(jīng)過有效的病毒滅活方可上市，十多年的歷史經(jīng)驗(yàn)和科學(xué)實(shí)驗(yàn)證明加熱法和SD法可以有效滅活致命性的HIV、HBV和HCV，臨床上也沒有發(fā)現(xiàn)一例使用以上滅活方法的血制品而感染以上病毒的。國外有的廠家在1985年以前已開始使用加熱法滅活血液制品，回顧性訪問，也沒有發(fā)現(xiàn)一例感染上述病毒。國內(nèi)1996年開始使用SD滅活八因子，八十年代開始使用加熱法滅活白蛋白，也沒有發(fā)現(xiàn)問題。國內(nèi)外大量的數(shù)據(jù)證明，加熱法（巴氏法）和SD法對致命性的HCV、HBV和HIV的滅活是安全可靠的。當(dāng)然我們也必須認(rèn)識到SD技術(shù)對HAV和B19無任何滅活作用，SD技術(shù)的不足顯而易見，它對非脂包膜病毒的滅活效果幾乎沒有。盡管血漿經(jīng)過HAV篩選，但還是不夠，必須還有有效的滅活，美國一家公司1996年就因?yàn)榘艘蜃颖籋AV污染被迫召回全部產(chǎn)品。國外的專家建議長期使用只經(jīng)SD滅活的八因子，本身HAV抗體陰性的血友病患者，最好接種HAV疫苗，以獲得主動免疫。在我國由于特殊的飲食和衛(wèi)生習(xí)慣，健康成人人群中HAV抗體陽性率很高，血友病患者中的情況可能也類似，但對兒童接種HAV疫苗是一項(xiàng)不錯的選擇。SD技術(shù)的不足催生了SD加"干熱法"或加"蒸汽加壓加熱法"的應(yīng)用，也就是我們經(jīng)常提到的"兩步法"。
?、蹃喖姿{(lán)加紫外光C段照射。
用一定波長和一定量的紫外光照射光敏劑亞甲藍(lán)會產(chǎn)生一系列反應(yīng)（光激活作用），起到滅活病毒作用，主要針對非脂包膜病毒和耐熱病毒等，一般作為以上2種方法的補(bǔ)充。
上海血液中心已經(jīng)成功開發(fā)此項(xiàng)技術(shù)，相信不久的可將來可大規(guī)模的使用。亞甲藍(lán)作為"國家醫(yī)保"目錄中的一種常用藥，在臨床上廣泛使用，主要用于氰化物和亞硝酸鹽中毒的解救和手術(shù)中的導(dǎo)引劑等，據(jù)臨床醫(yī)生介紹常用劑量無明顯近期副作用，過大量使用可引起惡心、腹痛、心前區(qū)疼痛、眩暈、頭痛、出汗和神志不清及變性血紅蛋白血癥等，尤其是對兒童。長期使用的遠(yuǎn)期副作用不得而知。從血漿中去除它也需要一定技術(shù)，據(jù)稱目前去除率約85%，還有相當(dāng)?shù)臍埩袅俊?br /> ?、芗{米過濾
納米技術(shù)是一個(gè)時(shí)髦的話題，按照國際上通行的說法只有10nm-100nm的技術(shù)才可稱納米技術(shù)。在血液制品工業(yè)中，只有使用直徑為10nm-100nm的過濾器才可稱納米過濾。我們現(xiàn)在所看到的國內(nèi)各血制品廠家宣傳資料上宣稱的直徑最小的過濾器為200nm或只寫使用納米技術(shù)不介紹濾器直徑的大小。一般病毒如HIV和HBV等的直徑均小于100-150納米，甲肝病毒才27nm，直徑200nm的過濾器只能過濾細(xì)菌，而不能過濾絕大部分病毒。真正的鈉米技術(shù)在有些國外的廠家使用，它的優(yōu)點(diǎn)非常明顯，對血制品的活性無任何影響，但它也存在一次性使用價(jià)格過高，監(jiān)測困難等缺點(diǎn)等。該技術(shù)也只能成為以上①和②種方法的補(bǔ)充，單獨(dú)作為一種滅活方法風(fēng)險(xiǎn)較大。
?、輪慰寺】贵w免疫親和層析
在生產(chǎn)過程中，利用特定的抗體和特定的蛋白結(jié)合并與其它物質(zhì)分離的特點(diǎn)來提取和提純八因子，同樣它也可使所結(jié)合的蛋白和病毒分離。它的物理性分離實(shí)質(zhì)上也起到了病毒滅活作用，且對脂包膜和非脂包膜病毒都有效。由于它是①和②種方法的補(bǔ)充，對非脂包膜病毒滅活的意義遠(yuǎn)大于脂包膜病毒。由于具有一舉兩得的功效，在八因子的生產(chǎn)過程中大量使用，包括基因重組八因子。
?、薜蚉H孵放
利用某些血制品在生產(chǎn)過程中必須將PH拉低和某些病毒不耐酸的特點(diǎn)，將PH拉低至4同時(shí)孵放21天的技術(shù)滅活病毒。該技術(shù)在免疫球蛋白生產(chǎn)中大量使用，但也有專家提出不同看法，國內(nèi)外大量實(shí)驗(yàn)表明孵放14天仍檢出病毒。好在八因子的生產(chǎn)過程中不用該項(xiàng)技術(shù)。
病毒滅活技術(shù)很多，還有很多方法在試驗(yàn)中，病毒滅活技術(shù)再先進(jìn)，也不能完全杜絕病毒污染的可能性，但它的好壞決定了發(fā)生可能性的大小，選擇了理想的病毒滅活方法，發(fā)生的概率低至可以忽略不計(jì)，也就是說理論上有可能性，但事實(shí)上不會發(fā)生，我們也可以說經(jīng)過此方法處理的血制品是安全可靠的，是值得信賴的。但仍有一些人信賴血漿和冷沉淀，由于血漿和冷沉淀是一個(gè)獻(xiàn)血員對一個(gè)接受者，也就是所謂的"一對一"，而八因子可能是5000份以上血漿的混合生產(chǎn)，所謂的"多對一"，有人認(rèn)為前者可能更安全，染上病毒的概率更低，但不要忘記前者無"LookBackSystem",無法避免"窗口期"病毒污染，也無法避免檢測試劑的漏檢率，無有效的病毒滅活工藝，退一步說血友病患者需終身使用血制品，多次使用來源于不同人的血漿，"一對一"的概念其實(shí)是不存在的，這種所謂的相對安全是站不住腳的，尤其在我國還沒有病毒滅活血漿上市。國內(nèi)外的經(jīng)驗(yàn)證明使用經(jīng)過有效病毒滅活的血制品大大安全于沒有經(jīng)過處理的血漿或冷沉淀。
五、禍兮福所倚
人類從發(fā)現(xiàn)血友病到利用血漿補(bǔ)充治療，發(fā)展到冷沉淀，到粗提取八因子到精制免疫層析八因子，從沒有病毒滅活到多種滅活技術(shù)廣泛應(yīng)用，從必須從血漿中提取，到基因重組，整個(gè)技術(shù)的走向是追求更安全的八因子。但我們看到盡管重組八因子避免了從血漿中提取，但它還是需要人或動物的細(xì)胞作為培養(yǎng)基，部分產(chǎn)品還是要添加人血白蛋白作為穩(wěn)定劑，理論上的風(fēng)險(xiǎn)已經(jīng)是很小了，但還是存在的。但在最好的技術(shù)沒有來臨之前我們只能選擇當(dāng)前最好的產(chǎn)品，從安全性由高到低來看，基因重組產(chǎn)品>加熱法或"兩步法"人血八因子>單一的SD滅活人血八因子>未經(jīng)滅活處理的血漿和冷沉淀。
轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究也是如火如荼，上?？茖W(xué)家曾一繁教授將人的八因子基因片段植入牛的胚胎細(xì)胞，待牛長大以后，利用牛奶作為表達(dá)方式，可以大量生產(chǎn)八因子。盡管目前表達(dá)率較低，提純方法也是問題，但前景還是被看好，主要是價(jià)格的低廉。
真正的終極解決方法是基因治療，美國有一家公司以人肝的或肌肉細(xì)胞作為靶細(xì)胞的血友病乙基因治療方法已通過FDA批準(zhǔn)開始臨床二期試驗(yàn)，血友病甲的基因治療方案正處于臨床試驗(yàn)前期（Preclinical）。如果到最終成功的那天，血友病將成為一種治療方法極為簡便的疾病，如同治療一次普通的肺炎且一勞永逸，這是實(shí)實(shí)在在的可能，不是空想，但愿那時(shí)費(fèi)用也不是問題。
美國批準(zhǔn)可上市的治療血友病甲的藥物
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商品名 生產(chǎn)公司 來源 病毒滅活 穩(wěn)定劑 備注
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一. 重組八因子
Helixate Aventis Behring 基因重組 免疫親和層析 蔗糖
Kogenate Bayer 基因重組 免疫親和層析 蔗糖
Recombinate Baxter Hyland Immuno 基因重組 免疫親和層析 白蛋白
ReFacto Genetics 基因重組 免疫親和層析/SD 蔗糖
二.單克隆抗體層析高純度的濃縮人血八因子
Hemofil Baxter Hyland Immuno 人體血漿 免疫親和層析/SD
Monarc-M American Red Cross 人體血漿 免疫親和層析/SD
Monoclate Aventis Behring 人體血漿 免疫親和層析/巴氏
三.適用于VW因子缺乏的濃縮八因子
Alphanate Alpha Therapeutics 人體血漿 親和層析/SD/干熱
Humate-P Aventis Behring 人體血漿 巴氏 唯一經(jīng)過FDA批準(zhǔn)用于VWF缺乏的患者。
Koate DVI Bayer 人體血漿 SD/干熱
四.其它
Hyate-C Speywood Biopharm 豬血 無 用于產(chǎn)生抗人八因子抗體的患者
中國批準(zhǔn)上市的八因子
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海莫萊士 上海萊士 人體血漿 SD技術(shù)/干熱（100℃0.5小時(shí)）
康斯平 河南華蘭 人體血漿 SD技術(shù)/納米過濾
安徽綠十字
