貓傳染性腹膜炎的病因及診斷
Pathogenesis and Diagnosis of Feline InfectiousPeritonitis
(友情提示:內(nèi)有大量病理照片,非專(zhuān)業(yè)人士慎入)
姚海峰 獸醫(yī)外科博士
近來(lái),越來(lái)越多的貓被單純使用試紙條診斷為貓傳染性腹膜炎,致使很多貓被無(wú)端安樂(lè)死,甚至有些根本無(wú)臨床癥狀的貓被安樂(lè)死!我還聽(tīng)說(shuō)過(guò)一救助大戶(hù),因?yàn)椴槌鲐埞跔畈《娟?yáng)性,一下子安樂(lè)死30多只貓的案例,聽(tīng)到這些信息,除了震驚、氣憤、無(wú)奈、感嘆,還能有什么感受!前一段時(shí)間,有個(gè)女孩帶著家里的貓到醫(yī)院去體檢,體檢項(xiàng)目基本正常,平常能吃能喝、沒(méi)有異常任何臨床癥狀,但是在做貓冠狀病毒檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性,醫(yī)生判斷為傳染性腹膜炎,并告知她會(huì)傳給家里其他的貓。小女孩深知這個(gè)病得了基本上等于宣判死刑?;谢秀便钡膸е埢亓思?,但是有家不敢進(jìn),就坐在家門(mén)口哭了一晚上。還有個(gè)例子,昨天我接診了兩個(gè)暹羅貓,也是在前幾天剛在其它醫(yī)院檢測(cè)了貓糞便中的冠狀病毒,結(jié)果陽(yáng)性,同樣是告知她貓患了傳染性腹膜炎。貓主人,輾轉(zhuǎn)反側(cè)了好多天,幾乎是好幾天徹夜未眠。后來(lái)她帶貓找我檢查,我從腳趾頭查到眼底、胸腔查到腹腔、腎臟查到尾根......沒(méi)有發(fā)現(xiàn)一絲蛛絲馬跡能夠與傳染性腹膜炎對(duì)上號(hào)......
太多的震驚和無(wú)奈了,我一直想寫(xiě)一篇關(guān)于貓傳染性腹膜炎的文章來(lái)告知大家如何正確診斷此病,以及如何科學(xué)看待此病。經(jīng)過(guò)我一周的努力,查閱近50篇文獻(xiàn),總結(jié)和編輯圖片40張,總算寫(xiě)完了貓傳染性腹膜炎的病因及診斷。希望能給同行以及為了此病苦苦掙扎的養(yǎng)貓主人們一點(diǎn)有用的信息。
總而言之,無(wú)數(shù)的學(xué)者及文獻(xiàn)一致認(rèn)為:?jiǎn)为?dú)檢測(cè)貓冠狀病毒抗原或是抗體來(lái)診斷貓傳染性腹膜炎,都是武斷的行為。
一、簡(jiǎn)介
FIP是目前導(dǎo)致貓死亡最多的疾病之一。貓傳染性腹膜炎的英文名稱(chēng)為FelineInfectiousPeritonitis,縮寫(xiě)為FIP,是由由貓冠狀病毒(FCoV)引發(fā)是一種免疫介導(dǎo)性疾病。FIP的診斷和治療對(duì)于每一個(gè)獸醫(yī)來(lái)說(shuō)都是一種巨大的挑戰(zhàn),原因有四個(gè):(1)發(fā)生率高;(2)很多時(shí)候診斷困難;(3)在多貓環(huán)境下,幾乎無(wú)法阻止發(fā)生;(4)在很短時(shí)間內(nèi)幾乎是不可逆轉(zhuǎn)的出現(xiàn)死亡。在送檢到美國(guó)獸醫(yī)教學(xué)醫(yī)院的案例中每200個(gè)貓的案例,其中一個(gè)就是貓的傳染性腹膜炎。
目前針對(duì)貓傳染性腹膜炎(FIP)的診斷沒(méi)有臨床癥狀病癥學(xué)或是特異性的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)法。存在FIP抗體并不能說(shuō)明患有傳染性腹膜炎,同樣若是沒(méi)有FIP抗體,也并不能排除FIP。很多學(xué)者都認(rèn)為單純的血清學(xué)檢查結(jié)果在診斷方面是受局限的。PCR檢查能夠直接檢測(cè)FCoV基因,盡管他們?cè)跈z測(cè)貓冠狀病毒感染時(shí)非常敏感,但是這個(gè)檢測(cè)結(jié)果需要與貓所表現(xiàn)的臨床癥狀相結(jié)合,并不能單純用來(lái)診斷FIP。比較權(quán)威的FIP診斷應(yīng)該由組織病理學(xué)或通過(guò)免疫熒光染色/免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)FCoV抗體來(lái)決定。[1]
貓冠狀病毒(FCoV)是古老的冠狀病毒家族中一員。貓冠狀病毒分為兩種類(lèi)型,I型和II型,這兩種類(lèi)型都可以引起貓的傳染性腹膜炎。貓冠狀病毒通過(guò)“糞便—口腔”途徑在貓之間傳播,但是并不會(huì)傳染給其他種類(lèi)動(dòng)物。在養(yǎng)貓集中地方,冠狀病毒特異性的抗體的陽(yáng)性率可以達(dá)到90%之多,而在單個(gè)養(yǎng)貓場(chǎng)所也可以高達(dá)50%。但是值得注意的是,在這些病毒感染陽(yáng)性者中只有約5%的最后會(huì)發(fā)生貓傳染性腹膜炎。[2][3]最初的時(shí)候,曾經(jīng)有假設(shè)貓冠狀病毒分為兩種類(lèi)別:一種是腸道冠狀病毒,不會(huì)引起貓傳染性腹膜炎,另外一種則是腸道冠狀病毒的變異,可以引起貓傳染性腹膜炎。但是最近的研究表明,所有的貓冠狀病毒均可以引起貓傳染性腹膜炎,通過(guò)反轉(zhuǎn)錄PCR研究表明,之前的假設(shè)不成立,只有同一種病毒的毒力表現(xiàn)不同而已。[4]
FIP病變的精確過(guò)程不清楚,但是有以下兩個(gè)主要的假說(shuō)。[5]第一個(gè)假說(shuō)是:內(nèi)源性變異假說(shuō),病毒在巨噬細(xì)胞內(nèi)發(fā)生復(fù)制。[6-9]在這種情況下,貓感染沒(méi)有毒力的貓冠狀病毒,這些病毒在腸道細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。在某些情況下,貓冠狀病毒的某些基因片段出現(xiàn)突變,形成不同的表型,使它有能力在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。盡管稱(chēng)為內(nèi)源性理論,沒(méi)有一致的數(shù)據(jù)證明存在會(huì)出現(xiàn)一致性的變異。但是支持這個(gè)理論的依據(jù)是,即便在實(shí)驗(yàn)條件下,高毒力的貓冠狀病毒能夠持續(xù)的誘發(fā)FIP。[10]第二個(gè)假說(shuō):任何的貓冠狀病毒都可以引發(fā)FIP,是否出現(xiàn)FIP與貓的免疫應(yīng)答機(jī)制決定。[9-14]兩個(gè)假說(shuō)的關(guān)鍵病理核心過(guò)程都是病毒在巨噬細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。如果早期沒(méi)有將感染具有復(fù)制能力的病毒物質(zhì)的巨噬細(xì)胞清除掉,身體將出現(xiàn)致命的III型變態(tài)反應(yīng),這就出現(xiàn)了傳染性腹膜炎。
受感染的貓將出現(xiàn)癥狀主要由(1)目標(biāo)器官的肉芽腫性病變,包括中樞神經(jīng)、眼睛以及實(shí)質(zhì)器官,這些器官發(fā)生病變的幾率較低一些,通常需要特殊手段才能夠診斷清楚。(2)血管炎導(dǎo)致體腔內(nèi)積液,如腹水、胸腔積液、心包積液、陰囊積液等。腸道結(jié)節(jié)型則比較少見(jiàn),年輕貓腹瀉和嘔吐通常與腸道肉芽腫性病變有關(guān)。[15]另外有些不常見(jiàn)的癥狀也有報(bào)道,如皮膚脆弱綜合征,其它皮膚損傷包括結(jié)節(jié)性皮膚病變、丘癥樣皮膚損傷、足部皮炎等。[17,18]有一只貓表現(xiàn)陰莖異常勃起,這個(gè)陰莖的免疫組化檢測(cè)貓冠狀病毒抗體陽(yáng)性。
二、癥狀
Ⅰ. 一般癥狀
A. 癥狀可能突然出現(xiàn),也可能在數(shù)周內(nèi)緩慢出現(xiàn)。
B. 早期癥狀無(wú)特異性,比如厭食,體重減輕,精神差和脫水。
C.39.5-40.6℃(103.1-105.1℉)燒,為抗生素耐受性和忽高忽低的發(fā)燒。
D.可能會(huì)有黃疸
E.貧血
F. 腹圍大,觸診有波動(dòng)感
G. 瞳孔大小不一
Ⅱ. 滲出性
A. 可能出現(xiàn)發(fā)燒。
B. 腹腔積液——有典型的腹水
C.胸腔積液,出現(xiàn)呼吸急促或呼吸困難,心音弱,和/或黏膜蒼白。
D.心包積液,同樣表現(xiàn)為呼吸困難。
E. 可能出現(xiàn)黃疸
F.可能出現(xiàn)虹膜變色——主要由虹膜炎導(dǎo)致
Ⅲ. 非滲出性
A.癥狀不明顯。
B.常見(jiàn)持續(xù)發(fā)燒和體重減輕。
C.癥狀反應(yīng)出被影響的器官。
1.最常受影響的是腹腔器官(腎臟,淋巴結(jié),腹膜和大網(wǎng)膜,肝臟)。
2.神經(jīng)癥狀——取決于被感染的部位。
3.視覺(jué)的損傷包括膿性顆粒性葡萄膜炎,眼前房淤血,視網(wǎng)膜出血,周?chē)苎?,或脈絡(luò)視網(wǎng)膜炎。
D.可能出現(xiàn)黃疸
E.觸診腹部有疼痛感
F.個(gè)別案例可以發(fā)現(xiàn)腸系膜淋巴結(jié)腫大。
三、診斷
由于FIP不僅常見(jiàn)并且是致死性的,目前還沒(méi)有有效的長(zhǎng)期治療的方案,一個(gè)可信的并且快速診斷方案至關(guān)重要。然而,臨床上精確診斷FIP是非常具有挑戰(zhàn)性的。在沒(méi)有滲出性病變的案例中,而又不能使用非侵襲性的診斷方法診斷FIP尤為困難。當(dāng)有積液存在時(shí),首先需要檢測(cè)積液,進(jìn)行排查,這種方法要比檢測(cè)血液的指標(biāo)更具有參考性。在沒(méi)有滲出性案例中,很多情況都需要了解,包括病史、貓的來(lái)源、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)改變、抗體滴度都應(yīng)該考慮在內(nèi),根據(jù)這些信息來(lái)決定是否需要做侵入性的進(jìn)一步確診。FIP診斷流程主要包括:
1.常規(guī)檢查(TPR三大指標(biāo)——體溫、心率、呼吸,腹部觸診、胸部叩診)
2.血液學(xué)檢查(包括血常規(guī)、生化全項(xiàng)檢查)
3.眼科檢查(包括眼前房、視網(wǎng)膜檢查)
4.影像學(xué)檢查(胸腹X線片,腹部及胸部B超檢查)
5.積液檢測(cè):胸腔液、腹腔液檢查及腦脊液檢測(cè)(細(xì)胞學(xué)檢查、蛋白含量測(cè)定、細(xì)胞總數(shù)測(cè)定、李凡他試驗(yàn))
6.測(cè)量抗體滴度
7.Rt-PCR檢測(cè)
8.免疫復(fù)合體檢測(cè)
9.開(kāi)腹探查及尸體剖檢——最終方法。
10.巨噬細(xì)胞內(nèi)免疫熒光染色(包括熒光染色及免疫組化檢測(cè))
依據(jù)以上流程及參考資料我繪制了一張傳染性腹膜炎診斷流程圖,供大家參考。
圖0.貓傳染性炎標(biāo)準(zhǔn)化診斷流程
(一)、血液學(xué)和血液生化指標(biāo)評(píng)估
通?;加蠪IP的案例血液學(xué)指標(biāo)通常不正常,但是其指標(biāo)變化不具有病理性改變。白細(xì)胞可能升高或是降低。通常出現(xiàn)淋巴細(xì)胞減少癥,主要由于病毒感染巨噬細(xì)胞后釋放腫瘤壞死因子-α(TNFα),使其濃度增高,導(dǎo)致未受感染的T淋巴細(xì)胞凋亡所致。[20]但是淋巴細(xì)胞減少合并白細(xì)胞減少在貓受驚嚇時(shí)經(jīng)??梢砸?jiàn)到,在另外一些貓的嚴(yán)重疾病中也可以見(jiàn)到類(lèi)似血象,因此以上的血象并不能說(shuō)明就是感染FIP后所致。輕度至中度的再生障礙性貧血也是貓患有FIP時(shí)常見(jiàn)的臨床指征,但這也是非特征性的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)異常,因?yàn)樵谪埖钠渌芏嗦约膊≈卸紩?huì)有類(lèi)似現(xiàn)象。
最常見(jiàn)的血液學(xué)指標(biāo)異常是總蛋白濃度升高,主要是因?yàn)榍虻鞍诐舛仍龈撸貏e是γ球蛋白。[21,22]在一份研究中表明,患有滲出性病變的貓中50%的案例有高蛋白血癥,沒(méi)有滲出性病變的案例中70%的貓患有高蛋白血癥。[23]實(shí)驗(yàn)室誘發(fā)病例研究發(fā)現(xiàn),在早期感染時(shí),只有α2球蛋白出現(xiàn)升高,而γ球蛋白和抗體滴度升高只有在出現(xiàn)臨床癥狀前才出現(xiàn)。[24,25]從γ球蛋白典型的高水平和抗體滴度升高可以得出結(jié)論高γ球蛋白血癥是特異性的抗貓冠狀病毒免疫反應(yīng)引起的??贵w滴度和高γ球蛋白血癥顯示了線性關(guān)系,但是在γ球蛋白數(shù)值一定條件下,抗貓冠狀病毒滴度變化比較大,這些暗示了另外的自身免疫反應(yīng)在FIP致病機(jī)理中起了很大的作用。另外B細(xì)胞受刺激后同樣可以產(chǎn)生部分γ球蛋白,這些結(jié)果都使得γ球蛋白增高。至此,患有FIP的貓總蛋白濃度可以達(dá)到非常高,高達(dá)120g/L,甚至更高。白蛋白與球蛋白比值比血清總白蛋白濃度或是γ球蛋白濃度具有更高診斷價(jià)值,可以讓我們把FIP與其它類(lèi)似疾病相鑒別診斷,因?yàn)檠灏椎鞍紫陆悼赡軐?dǎo)致生成不足合并肝臟衰竭或蛋白流失。[27,28]患FIP貓的蛋白丟失主要是由于免疫復(fù)合物沉積到腎臟引起;當(dāng)腸道有肉芽腫性病變時(shí),蛋白也可以從腸道丟失;當(dāng)有血管炎時(shí),蛋白也可以通過(guò)滲出體液流失。[28]白蛋白與球蛋白比值小于0.8。
血清蛋白電泳液常用來(lái)診斷懷疑FIP的案例。主要用來(lái)分區(qū)是單克隆或是多克隆的γ高球蛋白血癥是由FIP還是由腫瘤引起的。但是貓患有FIP時(shí),這兩種球蛋白都存在,在腫瘤案例中也是相同情況。因此電泳檢測(cè)的價(jià)值就受到限制。
其它實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)包括肝臟酶、膽紅素、BUN、CRE也常見(jiàn)到升高,這些數(shù)值的變化,主要取決于器官受損害的程度。高膽紅素血癥和黃疸比較常見(jiàn),通常反應(yīng)肝臟壞死。有時(shí)FIP病例膽紅素升高沒(méi)有任何溶血、肝臟疾病或是膽管疾病的證據(jù)。這種異常的指標(biāo)通常只有在被血癥的動(dòng)物可以見(jiàn)到;膽紅素轉(zhuǎn)移和分泌進(jìn)入膽管系統(tǒng)受到限制,造成這種情況的可能原因是高水平的TNFα抑制穿膜作用。因此,如果出現(xiàn)高膽紅素,同時(shí)沒(méi)有溶血和肝臟指標(biāo)變化,F(xiàn)IP的嫌疑將增大。[28]
最近研究集中在急性期反應(yīng)指標(biāo)包括α1-acid-glyco-protein(AGP),當(dāng)貓患有FIP時(shí),這種血清急性期蛋白會(huì)增高。AGP升高(>3mg/ml)時(shí)可以為FIP的診斷加分,但是這個(gè)蛋白在其它炎性疾病時(shí)同樣會(huì)升高,因此其不具有特征性診斷意義。
圖1.典型貓傳染性腹膜炎生化及血常規(guī)指標(biāo)
從此化驗(yàn)單中,可以看到貧血、總蛋白Tp升高、球蛋白glob增高,
白球比值=27/63<0.8,至少有四項(xiàng)與傳染性腹膜炎符合。
圖2.典型貓傳染性腹膜炎生化及血常規(guī)指標(biāo),與圖1中的為同一案例。
隨著病情發(fā)展,膽紅素Tbil增高,球蛋白增高、總蛋白增高、
白球比仍然<0.8;并且合并酸堿平衡和離子平衡嚴(yán)重失調(diào)。
(二)、眼科檢查
眼部病變典型案例
圖3.患傳染性腹膜炎的貓,瞳孔大小不一,同時(shí)合并有
神經(jīng)癥狀,主要由中樞神經(jīng)肉芽腫性病變導(dǎo)致
圖4.患傳染性腹膜炎的暹羅貓,右側(cè)虹膜變色、
眼前房混濁;同時(shí)伴有神經(jīng)癥狀。
圖5.患有傳染性腹膜炎的幼年貓,雙側(cè)瞳孔變形,
眼前房混濁并有滲出物,虹膜血管增生。
圖6.患傳染性腹膜炎的貓,眼部特寫(xiě),
見(jiàn)虹膜變色、前房沉積物。
圖7.患傳染性腹膜炎的貓,眼部特寫(xiě),
虹膜血管增生、前房沉積物。
圖8.患傳染性腹膜炎的貓,眼部特寫(xiě),
前房混濁、纖維素性團(tuán)塊沉積于前房。
圖9.患傳染性腹膜炎的貓,視網(wǎng)膜照片,見(jiàn)視網(wǎng)膜血管擴(kuò)張、
整個(gè)視網(wǎng)膜水腫,多處視網(wǎng)膜內(nèi)滲出。
圖10.患傳染性腹膜炎的貓,視網(wǎng)膜照片,視網(wǎng)膜血管擴(kuò)張、
視網(wǎng)膜出血及視網(wǎng)膜內(nèi)白色滲出物。
(三)、影像學(xué)檢查
影像學(xué)檢查根據(jù)臨床需求檢查項(xiàng)目包括:胸腹部X線片,腹部B超檢查、胸部B超檢查機(jī)心臟超聲檢查。以便區(qū)分腹水、胸水、心包積液等等。并可在B超引導(dǎo)下作穿刺,以便為進(jìn)一步診斷提供依據(jù)。
圖11患有腹水的貓腹部X線片
圖12患貓傳染性腹膜炎,有腹水,腹部B超,腎周可見(jiàn)到腹腔積液
圖13患貓傳染性腹膜炎的貓,有腹水,腹部B超,可見(jiàn)到腹腔積液
圖14患貓傳染性腹膜炎的貓,腹部觸診腸系膜淋巴結(jié)腫大,
B超診斷中見(jiàn)到腫塊影像。
圖15患貓傳染性腹膜炎的貓,腹部觸診單側(cè)腎腫大、疼痛,
B超診斷中見(jiàn)到腎皮質(zhì)與腎被膜之間壞死,并有少量積液。
圖16患貓傳染性腹膜炎的貓,與圖15為同一案例,剖檢時(shí)見(jiàn)到腎臟表面肉芽腫性病變。
圖17患貓傳染性腹膜炎的貓,與圖16,15為同一案例,剖檢時(shí)見(jiàn)到腎臟表面肉芽腫性病變。
圖18患貓傳染性腹膜炎的貓,呼吸窘迫。X線片側(cè)位示胸腔積液。
圖19患貓傳染性腹膜炎的貓,與圖18為同一案例。X線片正位示胸腔積液。
圖20患貓傳染性腹膜炎的貓,呼吸窘迫,X線片側(cè)位示心包積液。
圖21患貓傳染性腹膜炎的貓,呼吸窘迫,與圖20為同一案例,
胸部心臟超聲檢查示心包積液。
(四)、積液檢查
所有患有積液的貓中,F(xiàn)IP約占到一半。[34]積液的表現(xiàn)形式有:胸腔積液、腹腔積液、胸腹腔同時(shí)積液、心包積液等等。很多人將腹腔內(nèi)抽出黃色、發(fā)粘的液體稱(chēng)為“典型傳染性腹膜炎”,但是僅僅檢查到這些液體,而沒(méi)有其它檢查或是癥狀來(lái)佐證,則不能夠做出診斷。有時(shí)患有FIP的貓其積液可能與常見(jiàn)的表現(xiàn)不同,如報(bào)道抽出純?nèi)槊有匾后w,后經(jīng)診斷確診為FIP。[35]
通常情況下,液體內(nèi)的蛋白含量很高(>3.5mg/dl),一般都為滲出型,而細(xì)胞含量較低(<5000有核細(xì)胞/ml)。
要區(qū)分貓滲出性還是漏出性液體,可以使用李凡他試驗(yàn)。在一篇關(guān)于貓積液性疾病的研究報(bào)告中指出李凡他試驗(yàn)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)性為86%,陰性預(yù)測(cè)性為96%,而這些積液性案例的FIP患病率為51%。[28]在貓患有細(xì)菌性腹膜炎、淋巴肉瘤時(shí)李凡他試驗(yàn)結(jié)果會(huì)呈陽(yáng)性,但是這些情況很容易通過(guò)其他檢查項(xiàng)目以及細(xì)胞學(xué)檢查或是細(xì)菌培養(yǎng)等方式進(jìn)行鑒別診斷。
因FIP導(dǎo)致的貓神經(jīng)性損傷,分析腦脊液可以看到蛋白含量增高(50-350mg/dl,正常值不超過(guò)25mg/dl)腦脊液細(xì)胞增多(100-10000有核細(xì)胞/ml)主要包括中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞核和巨噬細(xì)胞。[36-38]但是這個(gè)指標(biāo)并非是特異性的,很多貓患有FIP并表現(xiàn)神經(jīng)癥狀時(shí),腦脊液檢查結(jié)果正常。
圖22.從患有貓傳染性腹膜炎的胸腔內(nèi)抽出的液體,“典型”黃綠色,粘性很高。
圖23. 從患有貓傳染性腹膜炎的胸腔內(nèi)抽出的液體,離心后染片鏡檢。
典型的細(xì)胞形態(tài):可見(jiàn)到大量的中性粒細(xì)胞核和巨噬細(xì)胞。
圖24.腹腔液激光五分類(lèi)檢查,見(jiàn)到大量的有核細(xì)胞,以及白細(xì)胞總數(shù)較高。
圖25.患傳染性腹膜炎的貓,腹腔液或是胸腔液李凡他試驗(yàn)陽(yáng)性
(五)、測(cè)量抗體
血清抗體滴度檢測(cè)是用途比較廣泛的方法。但是非常高比例貓冠狀病毒(FCoV)陽(yáng)性的貓,絕大部分是不會(huì)發(fā)展為傳染性腹膜炎(FIP)的。臨床上沒(méi)有針對(duì)FIP抗體的檢測(cè),所有的抗體檢測(cè)均是針對(duì)貓冠狀病毒的。這項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目實(shí)際應(yīng)用中看來(lái)是沒(méi)有診斷價(jià)值的,根據(jù)這個(gè)結(jié)果來(lái)判斷貓是否患有FIP是明顯錯(cuò)誤的方案。有文章報(bào)道因?yàn)闄z測(cè)FCov抗體,錯(cuò)誤引導(dǎo)大家認(rèn)為是患有FIP而導(dǎo)致死亡的貓比貓本身患FIP死亡的案例要高很多。[39]同時(shí)抗體滴度檢測(cè)同樣存在不穩(wěn)定性,有文章報(bào)道,同一個(gè)貓的血清分成五份,分別送到美國(guó)的五個(gè)不同實(shí)驗(yàn)室,居然給出來(lái)5個(gè)不同的結(jié)果。[40]
需要值得注意的是冠狀病毒抗體陽(yáng)性并不能表示患有FIP,同樣未檢測(cè)到冠狀病毒抗體也不能排除FIP。低或是中度的抗體滴度沒(méi)有診斷價(jià)值。[28]
積液或是腦脊液的抗體滴度檢測(cè),對(duì)于FIP診斷同樣意義不大。[43-46]
(六)、RT-PCR檢測(cè)
使用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)檢測(cè)血液中的貓冠狀病毒的頻率呈上升趨勢(shì),但是還沒(méi)有一種PCR技術(shù)可以準(zhǔn)確診斷貓傳染性腹膜炎(FIP)。
(七)、免疫復(fù)合物檢測(cè)
FIP是免疫介導(dǎo)性疾病,抗原抗體復(fù)合物在病理過(guò)程中起到了重要的作用,有人建議在血清或是積液中檢測(cè)這種復(fù)合物??乖贵w復(fù)合物的檢測(cè)可以使用酶聯(lián)免疫檢測(cè)試驗(yàn)(ELISA),但是這種手段同樣受到限制,一篇大量FIP和對(duì)照組案例的研究報(bào)告顯示器陽(yáng)性預(yù)測(cè)值不高,只有67%左右。[28]
(八)開(kāi)腹探查及尸體剖檢
對(duì)于難診斷性的貓傳染性腹膜炎案例,開(kāi)腹探查是最有效的診斷途徑??梢詸z查到腹腔內(nèi)臟器的病變,如腹膜、腸系膜、肝臟、腎臟、脾臟、腸系膜淋巴結(jié)、腸道表面漿膜層等部位病變。另外可以切取部分病變組織送檢,做組織熒光染色和免疫組化進(jìn)一步診斷。
圖26.患干性貓傳染性腹膜炎案例,剖檢,見(jiàn)到腹腔及胸腔內(nèi)大量纖維素性滲出,
以及腹腔內(nèi)臟器表面纖維素性滲出和肝臟表面肉芽腫性壞死。
圖27.患干性貓傳染性腹膜炎案例,患有神經(jīng)癥狀,
剖檢見(jiàn)到腦部肉芽腫性病變。
圖28.患濕性貓傳染性腹膜炎案例,黃疸;轉(zhuǎn)診過(guò)來(lái)時(shí),主人認(rèn)為是脂肪肝。
經(jīng)診斷發(fā)現(xiàn)為傳染性腹膜炎,開(kāi)腹探查見(jiàn)到大量粘稠腹水、
脂肪肝病變及網(wǎng)膜大量纖維素性滲出。
圖29.患干性貓傳染性腹膜炎案例,
開(kāi)腹探查見(jiàn)整個(gè)腸道表面大量纖維素性滲出。
圖30.患干性貓傳染性腹膜炎案例,
開(kāi)腹探查見(jiàn)整個(gè)腸道表面大量纖維素性滲出以及腸系膜淋巴結(jié)腫大。
圖31.患干性貓傳染性腹膜炎案例,
開(kāi)腹探查見(jiàn)腎臟表面肉芽腫性病變。
圖32患貓傳染性腹膜炎,腹腔內(nèi)大量凝凍樣腹水
圖33患貓傳染性腹膜炎,腸道表面肉芽腫性病變。
圖34 患貓傳染性腹膜炎,腎臟皮質(zhì)肉芽腫性病變
圖35患貓傳染性腹膜炎,腎臟皮質(zhì)肉芽腫性病變,
剖開(kāi)后可見(jiàn)到更明顯的病變
(九)、巨噬細(xì)胞內(nèi)貓冠狀病毒抗體免疫熒光檢測(cè)
方法有兩個(gè):一個(gè)是使用免疫熒光染色法檢測(cè)巨噬細(xì)胞內(nèi)FCoV抗體(積液內(nèi)巨噬細(xì)胞),另外一個(gè)是使用免疫組織化學(xué)(簡(jiǎn)稱(chēng)免疫組化)檢測(cè)組織內(nèi)的巨噬細(xì)胞內(nèi)FCoV抗體。免疫染色并不能區(qū)分“無(wú)害”FCov和引起FIP的FCoV。但是只有引起FIP的FCoV大量存在于巨噬細(xì)胞時(shí)檢測(cè)時(shí)才會(huì)被染上色。最近有一份對(duì)171個(gè)案例的研究報(bào)告,其中檢測(cè)組中的貓被分為兩組,一組是確定為FIP(占總數(shù)的64%),對(duì)照組為確定為其他病的非FIP動(dòng)物,結(jié)果顯示免疫熒光染色陽(yáng)性組的動(dòng)物,100%為FIP案例。[28]但是這個(gè)檢測(cè)中陰性預(yù)測(cè)值并不高,只有57%,有人解釋主要原因是滲出液中的巨噬細(xì)胞數(shù)量較少才導(dǎo)致的陰性結(jié)果。[28]
免疫組化用來(lái)檢測(cè)組織內(nèi)FCoV抗體,已經(jīng)被證明若是貓F(tuán)IP陽(yáng)性,則其準(zhǔn)確率達(dá)到100%。[52,53]然而這種方法的檢測(cè)需要手術(shù)開(kāi)腹探查才可取到需要的組織。對(duì)照研究顯示,開(kāi)腹探查切取組織樣本與細(xì)針穿刺活檢取得的樣本在診斷敏感性方面相近。[54]
因此這里有兩種檢測(cè)方法,如果有積液,則做積液涂片,然后做抗體熒光染色法檢測(cè)巨噬細(xì)胞內(nèi)抗體;如果沒(méi)有積液則需要做組織內(nèi)的免疫組化試驗(yàn)來(lái)確定。
圖36.患傳染性腹膜炎的貓,腸道肉芽腫性病變,
組織病理學(xué)切片,見(jiàn)到大量炎性細(xì)胞侵潤(rùn)。
圖37.患傳染性腹膜炎的貓,腸道肉芽腫性病變,
組織病理學(xué)切片,見(jiàn)到大量炎性細(xì)胞侵潤(rùn)。
上圖局部放大照片。
圖38,患傳染性腹膜炎的貓,腎臟病理切片。大量炎性細(xì)胞侵潤(rùn),腎小管壞死,腎炎。
圖39,患傳染性腹膜炎的貓,腹水免疫熒光染色陽(yáng)性。確診為FIP。
圖40,患傳染性腹膜炎的貓,腎組織免疫組織化學(xué)熒光染色——陽(yáng)性。
確診為FIP。
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