愛華網(wǎng)磷酸鹽緩沖液的配制
磷酸鹽是生物化學研究中使用最廣泛的一種緩沖劑，由于它們是二級解離，有二個pKa值，所以用它們配制的緩沖液，pH 范圍最寬：NaH2PO4：pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32
配酸性緩沖液：用NaH2PO4，pH＝1～4，
配中性緩沖液：用混合的兩種磷酸鹽，pH＝6～8，
配堿性緩沖液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
用鉀鹽比鈉鹽好，因為低溫時鈉鹽難溶，鉀鹽易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的緩沖液時，只能用磷酸鈉而不能用磷酸鉀，因為SDS(十二烷基硫酸鈉)會與鉀鹽生成難溶的十二烷基硫酸鉀。
磷酸鹽緩沖液的優(yōu)點為：①容易配制成各種濃度的緩沖液；②適用的pH范圍寬；③pH 受溫度的影響?。虎芫彌_液稀釋后pH變化小，如稀釋10倍后pH 的變化小于0.1。
其缺點為：①易與常見的鈣Ca2+離子、鎂Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀；②會抑制某些生物化學過程，如對某些酶的催化作用會產(chǎn)生某種程度的抑制作用.
pH | 0.2mol/L NaH2 PO4(ml) | 0.2mol/L Na2HPO4(ml) |
5.7 | 93.5 | 6.5 |
5.8 | 92.0 | 8.0 |
5.9 | 90.0 | 10.0 |
6.0 | 87.7 | 12.3 |
6.1 | 85.0 | 15.0 |
6.2 | 81.5 | 18.5 |
6.3 | 77.5 | 22.5 |
6.4 | 73.5 | 26.5 |
6.5 | 68.5 | 31.5 |
6.6 | 62.5 | 37.5 |
6.7 | 56.5 | 43.5 |
6.8 | 51.0 | 49.0 |
6.9 | 45.0 | 55.0 |
7.0 | 39.0 | 61.0 |
7.1 | 33.0 | 67.0 |
7.2 | 28.0 | 72.0 |
7.3 | 23.0 | 67.0 |
7.4 | 19.0 | 81.0 |
7.5 | 16.0 | 84.0 |
7.6 | 13.0 | 87.0 |
7.7 | 10.5 | 89.5 |
7.8 | 8.5 | 91.5 |
7.9 | 7.0 | 93.0 |
8.0 | 5.3 | 94.7 |
Na2HPO4·2H2O分子量= 358.22，0.2 mol/L溶液為71.64克/升。
NaH2PO4·2H2O分子量= 156.03，0.2 mol/L溶液為31.21克/升.
