三種熒光標(biāo)記的短雙鏈RNA體外轉(zhuǎn)染特性的比較--《第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào) 第四軍醫(yī)大學(xué)
首席醫(yī)學(xué)網(wǎng) 2007年10月23日 11:58:35 Tuesday757
作者:馬蕓,張仁禮,朱志華,聞安民,高軍,周燦權(quán),陳系古作者單位:1中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;2廣東省人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;3中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院生殖中心,廣東 廣州510080;4中山大學(xué)腫瘤防治中心胸外科,廣東 廣州 510060;基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金(30400474);廣東省自然科學(xué)基金(4009374)
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【摘要】 目的:比較三種不同熒光標(biāo)記的短雙鏈RNA(siRNA)體外轉(zhuǎn)染特性. 方法:利用脂質(zhì)體LipofectamieTM2000轉(zhuǎn)染三種熒光標(biāo)記siRNA入小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系NIH 3T3,流式細(xì)胞儀觀察轉(zhuǎn)染效率,普通倒置熒光顯微鏡觀察其淬滅情況,激光共聚焦顯微鏡觀察其在細(xì)胞內(nèi)的分布情況. 結(jié)果:相同轉(zhuǎn)染條件下三種熒光siRNA進(jìn)入細(xì)胞的速度,細(xì)胞內(nèi)的定位不同,轉(zhuǎn)染效率不同,三種熒光標(biāo)記的抗淬滅能力也不同. 結(jié)論:熒光標(biāo)記siRNA可以起到良好的示蹤作用. 用熒光標(biāo)記siRNA作為無熒光siRNA的分布和轉(zhuǎn)染效率參照時(shí),要考慮到所選用熒光標(biāo)記siRNA與無熒光標(biāo)記siRNA的差異.
【關(guān)鍵詞】 熒光標(biāo)記;siRNA;轉(zhuǎn)染
Comparison of transfection characters of three fluorescently labeled siRNA in vitro
MA Yun, ZHANG Ren
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